mRNA-EP制備的腫瘤血管靶向CAR-T細(xì)胞用于臨床研究的免疫學(xué)質(zhì)量和性能
Kanako Inoo , Ryo Inagaki , Kento Fujiwara , Shigemi Sasawatari , Takashi Kamigaki , Shinsaku Nakagawa , Naoki Okada
摘要：
我們先前報(bào)道了用血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)特異性嵌合抗原受體(CAR)基因工程。改造的腫瘤血管重定向T細(xì)胞在各種鼠實(shí)體瘤模型中表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤作用。在本研究中，我們通過CAR編碼mRNA電穿孔(mRNA-EP)制備了抗VEGFR2 CAR-T細(xì)胞，并分析了其免疫學(xué)特征和功能，用于臨床研究。在mRNA-EP后6-12小時(shí)達(dá)到峰值后，檢測(cè)到鼠和人T細(xì)胞上抗VEGFR2 CAR的表達(dá)，效率約為100%，持續(xù)數(shù)天。將鼠抗VEGFR2 CAR-T細(xì)胞三重轉(zhuǎn)移至B16BL6荷瘤小鼠中，結(jié)果證明其抗腫瘤作用與用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體改造的CAR-T細(xì)胞單次轉(zhuǎn)移的抗腫瘤作用相當(dāng)。通過活力、生長(zhǎng)和表型參數(shù)確定，mRNA-EP未對(duì)人T細(xì)胞特征造成任何損傷或缺陷。此外，表達(dá)不同CAR構(gòu)建體的兩種人抗VEGFR2 CAR-T細(xì)胞以抗原特異性方式分化為效應(yīng)期，具有細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞毒活性。這些結(jié)果表明，我們通過mRNA-EP制備的抗VEGFR2 CAR-T細(xì)胞在質(zhì)量和性能方面具有潛力，為作為細(xì)胞醫(yī)學(xué)的臨床研究提供安全性和有效性的前景。